瓊脂粉使用過程中常見的問題，信帆生物為您答疑解惑！

瓊脂粉是由瓊脂糖（agarose）和瓊脂果膠（agaropectin）組成的，溶解性是瓊脂粉不溶于冷水，易溶于沸水，緩溶于熱水。檢測凝膠強度為1.5%瓊脂粉溶液在20攝氏度凝固后，能夠表面不破承受的大壓強是800-1200g/cm2 在生物學實驗中，微生物培養(yǎng)基、植物組培培養(yǎng)基常規(guī)添加瓊脂粉的用量1.5-2% （工作濃度6-25g/L）。當實驗中遇到瓊脂粉不凝固時，常規(guī)的檢測方法時pH值，濃度，溫度，充分混勻等情況。

說明：培養(yǎng)基的配制，工作濃度6-25g/L

用途：微生物培養(yǎng)基、植物培養(yǎng)基原材料，一般添加量1.5-2%
瓊脂粉默認使用PH為中性， PH小于4則無法凝結(jié)，脂粉質(zhì)檢凝膠強度為1.5%濃度，800-1200g/cm2

常見問題解答：

一，生物實驗中遇到培養(yǎng)基加入瓊脂粉后，室溫不凝固的原因分析：
1、培養(yǎng)基PH值過低 ，偏酸，水解，瓊脂粉在PH值小于4則無法凝結(jié)。
2、所加瓊脂粉質(zhì)量不夠 ，增加用量。攪拌不均勻，倒板前沒有充分搖勻，凝固不均勻。
3、滅菌溫度過高，加熱時間過長。PH改變或破壞了瓊脂的凝固度
4、培養(yǎng)基沒有加熱溶解充分，就沒有凝固。

問題1：使用瓊脂粉配置的MS培養(yǎng)基顏色明顯變黃？影響實驗？
產(chǎn)品批次不一樣，有些批次的瓊脂粉就是顯黃色，不是質(zhì)量問題，不影響使用。
進口產(chǎn)品也有直接指出瓊脂粉是黃色為正?，F(xiàn)象。

問題2：凝膠強度？
答：凝膠強度（1.5%）≥800g/cm2  800-1200g/cm2，根據(jù)不同批次會有不同數(shù)值。
1.5g瓊脂粉溶于100ml水，溶解凝固后要放置20℃恒溫箱中靜置10小時以上，再測定凝膠強度。與溫度，水質(zhì)等有關(guān)。
一般瓊脂粉和卡拉膠，夏季使用濃度要比冬季偏高。夏季溫度高，保存時間久，可能會有部分降解，所以要達到同樣凝膠強度的用量就偏高。

問題3：瓊脂粉不凝固
1、培養(yǎng)基PH值過低 ，偏酸，水解
2、所加瓊脂量不夠 ，增加用量。攪拌不均勻，倒板前沒有充分搖勻，凝固不均勻。
3、瓊脂質(zhì)量不過關(guān)，瓊脂條在使用時添加量要稍微高一點，瓊脂粉是不是新買的
4、滅菌溫度過高，加熱時間過長。PH改變或破壞了瓊脂的凝固度
5、培養(yǎng)基沒有加熱溶解夠不夠，就沒有凝固。是不是瓊脂加錯了，營養(yǎng)瓊脂不會凝固。到平板時可以推薦在超凈臺內(nèi)吹干晾干，蒸發(fā)過多水分。

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