我們采用的酶：

辣根過氧化酶（HRP）

1. HRP在蔬菜作物辣根中含量很高。

2. 是一種糖蛋白，含糖量約18％；分子量為44kD。

3. 是一種復(fù)合酶，由主酶（酶蛋白）和輔基（亞鐵血紅素）結(jié)合 而成的一種卟啉蛋白質(zhì)。

4. 主酶為無色糖蛋白，在275nm波長(zhǎng)處有zui高吸收峰；輔基是深 棕色的含鐵卟啉環(huán)，在403nm波長(zhǎng)處有zui高吸收峰。

HRP催化下列反應(yīng)：

DH2+H2O2<==HRP==>D+2H2O

上式中DH2為供氫體，H2O2為受氫體。HRP對(duì)受氫體的專一 性很高，除H2O2外，僅作用于小分子醇的過氧化物和尿素的過 氧化物。后者為固體，作為試劑較H2O2方便。許多化合物可作 為HRP的供氫體，在ELISA中常用的供氫體底物為鄰苯二胺（orthopenylenediamine，OPD）、四甲基聯(lián)苯胺（3，3'， 5，5'-tetramethylbenzidine，TMB）和ABTS[2，2'-azino- bis(3-ethyl-benzthiazolinesulfonate-6)]。